Laboratory of Developmental Epigenetics

Павлова С.В. представит доклад
«Влияние коротких повторов РНК гена RepA, входящего в состав 1 экзона гена Xist, на Polycomb зависимое метилирование хроматина Х-хромосомы при инициации инактивации».
Доклад подготовлен по материалам статьи:
Zhao J., Sun B.K., Erwin J.A., Song J.-J., Lee J.T.
Polycomb Proteins Targeted by a Short Repeat RNA to the Mouse X Chromosome // Science.2008. V. 322. P. 750-756.
Аннотация.
В раннем эмбриогенезе самок млекопитающих происходит инактивация транскрипции генов одной из Х-хромосом (XCI, X-chromosome inactivation). Данный процесс начинается в локусе XIC (X-inactivation center) сверхэкспрессией некодирующей РНК (17.т.п.о. у мыши), которая накапливается и распространяется вдоль всей Х-хромосомы in cis. Вслед за распространением РНК Xist при участии Polycomb repressive complex 2 (PRC2), происходит триметилирование хроматина Х-хромосомы по H3K27. До момента инактивации сверхэкспрессия гена Xist подавляется экспрессией антисмыслового гена Tsix (Lee and Lu 1999), а инициация сверхэкспрессии нкРНК Xist парадоксальным образом сопровождается триметилированием промотора гена Xist по H3K27 (Sun et al., 2006).
Авторы открыли новую нкРНК размером 1,6 т.п.н. (RepA) внутри первого экзона Xist, который содержит эволюционно консервативные минисателлитные А-повторы. Было показано, что связывание RepA РНК с метилазой Ezh2, которая входит в состав комплекса PRC2, ингибируется РНК гена Tsix. Удаление RepA РНК, так же как и дефицит белков Polycomb, негативно влияет на сверхактивацию полноразмерной копии Xist нкРНК и триметилирование хроматина инактивируемой Х-хромосомы. Полученные данные позволили авторам предложить возможный механизм первых этапов инактивации.

Малахова А.А.
«Получение плюрипотентных стволовых клеток человека из семенников».
Доклад подготовлен по материалам статьи:
«Generation of pluripotent stem cells from adult human testis», опубликованной в журнале Nature (vol. 456(7220), p. 344-349) в 2008 году.
Аннотация
Примордиальные герминальные клетки человека и стволовые клетки зародышевой линии новорожденных и взрослых мышей являются плюрипотентными и по своим свойствам схожи с эмбриональными стволовыми клетками. В настоящем исследовании авторы сообщают об успешном получении герминальных стволовых клеток (haGSC) из сперматогоний семенников взрослого человека. Эти клетки проявляют сильное сходство с человеческими эмбриональными стволовыми клетками по морфологическим и молекулярным характеристикам и образуют тератомы после инъекции иммунодефицитным мышам. haGSC способны дифференцироваться в различные типы соматических клеток — производные трех зародышевых листков. Авторы заключают, что получение haGSC из биопсий семенников взрослого человека может оказаться простым и надежным подходом в индивидуальной клеточной терапии, не отягощенным этическими и иммунологическими проблемами, связанными с использованием эмбриональных стволовых клеток человека.

Григорьева Е.В.

«Получение индуцированных плюрипотентных стволовых клеток без вирусного встраивания».
Доклад подготовлен по материалам статей:
1. Stadtfeld M., Nagaya M., Utikal J., Weir G., Hochedlinger K. Induced pluripotent stem cells generated without viral integration // Science. 2008. V. 322(5903). P. 945-949.
2. Okita K., Nakagawa M., Hyenjong H., Ichisaka T., Yamanaka S. Generation of Mouse Induced Pluripotent Stem Cells Without Viral Vectors // Science. 2008. V. 22(5903). P. 949-953.

Аннотация
Индуцированные плюрипотентные стволовые (ИПС) клетки получают из соматических клеток мыши и человека благодаря внедрению транскрипционных факторов Oct4 и Sox2 в комбинации с Klf4 и c-Myc или Nanog и Lin28, используя ретро- или лентивирусы. Такие пациент-специфичные ИПС клетки могут быть использованы в изучении лекарственных препаратов и в регенеративной медицине. Значительный недостаток этой технологии – это использование потенциально вредных вирусов, способных интегрироваться в геном хозяина, вызывая риск образования опухолей.
На семинаре будут рассмотрены две работы, посвященные получению ИПС клеток мыши из фибробластов и клеток печени, используя невстраивающиеся временно экспрессирующиеся аденовирусы Oct4, Sox2, Klf4 и c-Myc. Эти аденовирусные ИПС клетки имеют деметилирование ДНК, характерное для репрограммированных клеток, экспрессируют эндогенные гены плюрипотентности, образуют тератомы и принимают участие в образовании многочисленных тканей, включая герминальную линию у химерных мышей. Данные результаты показали, что инсерционный мутагенез не является необходимым для in vitro репрограммирования. Аденовирусное репрограммирование может обеспечить усовершенствованный метод для получения и изучения пациент-специфичных стволовых клеток.