Молекула РНК-проводника sgRNA для внесения мутаций в консервативный участок промоторной области гена PPD-D1 мягкой пшеницы с применением системы редактирования генома CRISPR/Cas9

Патентообладатели

ИЦиГ СО РАН

Авторы
Киселёва А.А., Тимонова Е.М., Коложвари А.Э., Салина Е.А.

Краткая характеристика

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к молекуле РНК-проводника sgRNA для внесения мутаций в консервативный участок промоторной области гена PPD-D1 мягкой пшеницы с применением системы редактирования генома CRISPR/Cas9. Изобретение позволяет эффективно получать РНК-проводники, направляющие РНК со специфичной нуклеотидной последовательностью, которые могут быть использованы в системах CRISPR/Cas9 для внесения изменений в консервативный участок промоторной области гена PPD-D1 без изменения других участков генома зерновых.

Области возможного использования

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии растений, более конкретно к РНК-проводнику (молекуле, направляющей РНК, со специфичной нуклеотидной последовательностью) для контролирования экспрессии генов растений путем целенаправленного воздействия на нуклеотидную последовательность консервативного участка промоторной области гена PPD1 мягкой пшеницы системами редактирования генома CRISPR/Cas9, в которых молекулы РНК-проводника или сконструированный на его основе экспрессионный ДНК-вектор являются одним из компонентов.

Нуклеотидные последовательности доминантных (PPD-1a) и рецессивных (PPD-1b) аллелей гена PPD1, несущие мутации в области промотора

Степень готовности разработки к практическому применению

Разработка готова к практическому применению.

Возможный технический и (или) экономический эффект

Получение новых аллелей генов PPD1, имеющих мутации в регуляторных областях гена на неизменном генетическом фоне, является технической проблемой, для решения которой необходимо расширение арсенала средств, доступных селекционерам. Настоящее изобретение решает эту проблему путем изменения последовательности промотора PPD1 средствами редактирования геномов растений CRISPR/Cas9.

Сравнительные характеристики с известными разработками

Ранее был описан способ получения линий яровой мягкой пшеницы с укороченным сроком колошения путем маркер-опосредованного отбора линий, содержащих аллели Ppd-D1a и Vrn-B3a [ Салина Е.А., Стасюк А.И., Киселёва А.А. Способ отбора растений яровой мягкой пшеницы с укороченным сроком колошения // Патент России RU 2710729 C1, 10.01.2020]. Такой способ требует много времени и не исключает перенос нецелевых областей генома от сорта-донора. Возможность контролировать сроки колошения путем точечного изменения аллелей PPD1 позволит упростить процесс получения новых высокопродуктивных сортов, соответствующих современным требованиям.

Патентная защита разработки

Патент № 2822358 , опубл. 04.07.2024 , Бюл. № 19.