Способ выявления мутации p.L265P в гене MYD88

Патентообладатели

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Новосибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России) (RU); Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный  исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук»  (ИЦиГ СО РАН)

Авторы
Воропаева Е.Н., Поспелова Т.И., Максимов В.Н., Воевода М.И., Агеева Т.А., Гуражева А.А., Иванова А.А., Мельникова Е.С., Чуркина М.И., Карпова В.С.

Краткая характеристика

Из взятого у пациента образца выделяют ДНК. С помощью фланкирующих область расположения мутации p.L265P праймеров прямого (5′-GTACTTAGATGGGGGATGGCTGTTG-3′) и обратного (5′-ATTGCCTTGTACTTGATGGG ATG-3′) осуществляют ПЦР-амплификацию участка гена MYD88, потенциально содержащего мутацию p.L265P. Полученный ампликон обрабатывают эндонуклеазой рестрикции HinfI. Проводят электрофорез продуктов рестрикции и при выявлении аллелей длиной 148 п.н.; 148 п.н., 124 п.н. и 24 п.н.; 124 п.н. и 24 п.н. диагностируют соответственно мутацию p.L265P в гомозиготном, гетерозиготном состоянии и ее отсутствие. Способ применим на свежезабранном, замороженном биоматериале, FFPE-образцах, в т.ч. архивных, большая часть фрагментов ДНК которых имеет длину около 200 п.н.

Области возможного использования

Способ может быть использован в медицинской генетике, молекулярной биологии, в онкологии и гематологии.

Степень готовности разработки к практическому применению

Разработка готова к практическому применению.

Возможный технический и (или) экономический эффект

Использование способа позволит сократить длительность выявления рекуррентной мутации p.L265P в гене MYD88 на стандартном оборудовании в широкой клинической практике.

Сравнительные характеристики с известными разработками

Способ более чувствителен по сравнению с известным способом ПЦР-ПДРФ анализа FFPE-образцов; является простым, выполняется в течение 2 дней на доступном в клинической практике оборудовании.

Патентная защита разработки

Патент РФ № 2756909, опубл. 06.10.2021, Бюл. № 28. Патент ЕАПО № 043879, опубл. 30.06.2023.